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    家禽類食物中殘留四環素類抗生素的快速液相色譜檢測

    發布時間:2015-12-19        閱讀:2264

     目前,每年至少有50%的抗生素是用于畜牧業和水產養殖業。四環素類藥物是臨床使用zui多,zui廣泛的一類抗生素,由于具有水溶性好,體內代謝后大部分以原形排出以及在環境中不易發生生物降解等特點,從而成為容易在水環境中儲存和積蓄的一類抗生素。這些抗生素作為環境外源性化學物對環境生物及生態產生深遠的影響,并zui終可能對人類的健康和生存造成不利的影響。同時,由于該類藥物抗菌譜較廣,可以預測其所產生的生態毒理效應是巨大的。因而,對四環素藥物類的檢測尤為必要。

           使用伍豐EX1700超快速液相色譜系統對市面銷售的雞肉中殘留的四環素進行檢測,效果良好:對土霉素、四環素、金霉素的加樣回收率在80%以上。

    一、實驗條件

    1.實驗試劑

    標準品四環素、土霉素、金霉素均購自德國EhrenstorferQuality公司;甲醇、乙腈(色譜純)購自德國Meker公司;一水檸檬酸(AR)、二水檸檬酸三鈉(AR)、三(CL)乙酸(AR)和二水合草酸(AR)均購自上海潤捷化學試劑有限公司;自制超純水。

    2.  實驗條件

    儀器:伍豐EX1700超快速液相色譜系統

    色譜柱:UHPLC XB-C18 (1.8μm ,50 mm×4.6 mm i.d.)

    柱溫:25℃

    進樣量:25 μl

    流速:1.0 ml/min

    流動相:乙腈:甲醇:0.03 M草酸=17:8:75

    檢測波長:350 nm

    3. 實驗樣品的前處理

    3.1   樣品提取

    用電子天平準確稱取絞好的雞肉5 g,分別加入體積分數20%的三CL乙酸溶液2 mL,pH=4的檸檬酸緩沖液20 mL,加入5 ug/mL混合標樣100uL,機械混合10min,4 ℃、8000 r/min離心20 min,取上清液。

    3.2樣品萃取

    Strata C-18E (500mg,3ml)(購自美國Phenomenex公司),先加5 mL甲醇活化,后加5 mL超純水平衡,再取20 mL上清液上樣,接著用10 mL 5%甲醇溶液淋洗,zui后用10mL 0.01mol/L的草酸-甲醇溶液洗脫并收集,60 ℃氮氣吹干為止,1mL甲醇溶解,過0.45 μm濾膜,濾液供測定用。

    二、實驗結果

    1 雞肉中四環素類藥物檢測(添加水平0.1mg/kg)液相色譜圖

    添加水平:0.1mg/kg

    1—土霉素;2—四環素;3—金霉素

    2   雞肉中四環素類藥物檢測(空白)液相色譜圖

    雞肉空白

    3 添加回收結果

    三、 結論

        按照上述方法對雞肉中的土霉素、四環素及金霉素在伍豐EX1700上的超快速液相色譜分析檢測,加樣回收率在80%-90%之間,可以滿足雞肉中上述四環素的含量分析。

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