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    高效液相色譜儀會因為哪些因素引起干擾峰

    發布時間:2022-04-20        閱讀:189
      高效液相色譜法中的干擾峰是廣大色譜工作者甚為頭疼的事情,下面對高效液相色譜引起干擾峰的因素做一個簡單的歸納。
     
      一、試劑/溶劑
     
      高效液相色譜法中,常用的試劑主要是有機溶劑、各種鹽類及水。有機溶劑一般多為購買的色譜級,所以出現問題的幾率較小。但是分裝出的有機溶劑,由于多次使用,被污染的概率較大,因此引入干擾峰的幾率較高。其次是水,水中的雜質是干擾峰的主要來源之一,這是大家極易忽視的問題。采集波長較低的檢測方法,建議使用高品質水,這樣可以避免很多因為水質帶來的問題。再次是各種鹽類,這也是色譜干擾峰的主要來源之一。
     
      水和無機鹽引起的干擾峰,比較快捷的解決方案是安裝鬼峰補集柱,這樣可以有效的避免此類干擾。如果使用離子對試劑,則需選擇不影響離子對試劑的鬼峰補集柱。
     
      二、器材
     
      干擾峰來源的第二個方面是流動相配制及樣品前處理過程中接觸的各種器材。
     
      首先是流動相配制過程中接觸的器材,包括燒杯、玻璃棒、pH計、濾杯、濾膜、流動相瓶等。燒杯、玻璃棒是配制流動相首先接觸的器材,因此建議配制流動相的燒杯、玻璃棒專用。濾杯實驗人員只要清洗干凈一般不會帶來污染。需要注意的是,如果過濾含有離子對的流動相,建議增加清洗次數,避免清洗不干凈污染后續流動相。因此,對濾杯的清洗應該建立基本的洗滌規程,保證實驗人員對使用的器材清洗到位。濾膜也是干擾峰引入源頭之一。乙腈經過有機系濾膜過濾后,在梯度洗脫中會引入較大干擾峰。鑒于色譜級試劑廠家已經過膜,且多數儀器都有脫氣機,所以筆者建議無需再對甲醇、乙腈等純有機相過濾。流動相瓶引入干擾峰的現象主要出現在夏季,這是由于夏季溫度高,純水相容易滋生細菌。后續的流動相瓶使用人員清洗不到位,所以導致引入干擾峰。因此流動相瓶的清洗要建立嚴格的洗滌規程。
     
      再次樣品前處理過程中接觸的器材。前處理過程中接觸的器材主要包括容量瓶、濾頭、注射器及進樣瓶。容量瓶的清洗同流動相瓶、過濾裝置一樣,要建立良好的清洗規程。移液器材以及濾頭、注射器,多為塑料制品,其化學惰性較玻璃制品差,因此容易引入干擾峰。
     
      三、液相系統
     
      與前兩類干擾峰相比,液相系統干擾峰的解決更加困難。液相系統是一個動態過程,所以此類問題解決過程耗費時間長,而且要求實驗人員有很高的色譜素養。筆者對此類問題來源主要歸結為三類:強保留物質、離子對污染和管路滋生細菌。
     
      首先是強保留物質的干擾,其主要特征是寬峰。此類問題多數發生在等度洗脫中,梯度洗脫主要出現在高比例有機相處。這是由于強保留物質在當次進樣中未洗脫出,在后續進樣洗脫出來所致。

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