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    HPLC中常用的檢測器種類有哪些

    發布時間:2020-06-03        閱讀:9660
    檢測器是用來連續監測經色譜柱分離后的流出物的組成和含量變化的裝置。作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號,常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發光等。

    1、紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visibledetector,UVD)

    紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應用較廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對強吸收物質檢測限可達1ng,檢測后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測器串聯使用。紫外可見檢測器的工作原理與結構同一般分光光度計相似,實際上就是裝有流動池的紫外可見分光光度計。
     

    2、熒光檢測器(fluorescence detector,FD)

    是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,可檢測能產生熒光的化合物。某些不發熒光的物質可通過化學衍化生成熒光衍生物,再進行熒光檢測。其小檢測濃度可達0.1ng/ml,適用于痕量分析;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個數量級,但其線性范圍不如紫外檢測器寬。近年來,采用激光作為熒光檢測器的光源而產生的激光誘導熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比,因而具有很高的靈敏度,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應用。     
     

    3、示差折光檢測器(differential refractive Index detector,RID)

    示差折光檢測器是一種濃度型通用檢測器,對所有溶質都有響應,某些不能用選擇性檢測器檢測的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質進入另一種介質時,由于兩種物質的折射率不同就會產生折射。只要樣品組分與流動相的折光指數不同,就可被檢測,二者相差愈大,靈敏度愈高,在一定濃度范圍內檢測器的輸出與溶質濃度成正比。
     

    4、電化學檢測器(elec-chemical detector,ED)

     

    電化學檢測器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導等檢測器,屬選擇性檢測器,可檢測具有電活性的化合物。目前它已在各種無機和有機陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環境污染物、生化制品、農藥及醫藥等的測定中獲得了廣泛的應用。其中,電導檢測器在離子色譜中應用較多。
     

    5、化學發光檢測器(c iluminescence detector,CD)

    化學發光檢測器是近年來發展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器,其設備簡單,具有價廉、線性范圍寬等優點。其原理是基于某些物質在常溫下進行化學反應,生成處于激發態勢反應中間體或反應產物,當它們從激發態返回基態時,就發射出光子。由于物質激發態的能量是來自化學反應,故叫作化學發光。當分離組分從色譜柱中洗脫出來后,立即與適當的化學發光試劑混合,引起化學反應,導致發光物質產生輻射,其光強度與該物質的濃度成正比。

    這種檢測器不需要光源,也不需要復雜的光學系統,只要有恒流泵,將化學發光試劑以一定的流速泵入混合器中,使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產生化學發光,通過光電倍增管將光信號變成電信號,就可進行檢測。

     

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