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    高效液相色譜實現對試樣的分析的同時也要注意維護

    發布時間:2020-05-25        閱讀:1294

    高效液相色譜(HPLC)是色譜法的一種,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。高效液相色譜的維護建議考慮以下方面:

     

    一、流動相及樣品的制備要求

    1.高效液相級色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾,且流動相需要定期更換。

    2. 流動相脫氣至關重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法);

    3. 樣品溶解后,用0.22微米的有機系膜或者水系膜過濾。

     

    二、高壓恒流泵的維護和保養

    1. 高壓恒流泵為整個色譜系統提供穩定均衡的流動相流速,保證系統的穩定運行和系統的重現性。高壓輸液泵由步進電機和柱塞等組成,高壓力長時間的運行回逐漸磨損泵的內部結構。在升高流速的時候應梯度升高,建議每次升高0.2mL/min,當壓力穩定時再升高,如此反復直到升高到所需流速。

    2. 特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞;亦可用注射器吸取流動相通過吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇或甲醇超聲波清洗;清洗不成功則需要更換。

    3.在儀器使用完了以后,要及時清洗管路并沖洗泵,保證泵的良好運轉環境,保證泵的正常使用壽命。

     

    三、色譜柱的維護和保養

    1.所使用的流動相均應為HPLC級或相當于該級別的,在配置過程中所有非HPLC級的試劑或溶液均經0.22um薄膜過濾,而且流動相使用前都經過超聲儀超聲脫氣后才使用。

    2.所使用的水必須是經過蒸餾純化后再經過0.22um水膜過濾后使用,所有試液均現用現配。并且在進樣的樣品都必須經過0.22um薄膜針筒過濾后進樣。

    3.所使用到的大流速為1.0mL/min,所以流速提升過程應是梯度提升,不存在流速的突升突降。

    4.儀器檢測完,需要用流動相梯度洗脫色譜柱1小時以上。

     

    四、工作站的維護

     

    出現死機可重啟計算機;不正常運行時,首先可更換電腦測試其硬件故障;或在本機上重新插拔接口、重新安裝軟件。

     

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