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    高效液相色譜的日常維護注意事項

    發布時間:2020-04-13        閱讀:1520
        高效液相色譜是目前應用較多的色譜分析方法,高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。

        和其它分析儀器一樣,你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數據,首先你要保養好它,使它處于一個良好的待機狀態,這樣你操作它進行分析時就可以比較順利地獲得理想的結果。而且良好規范的操作習慣可以延長儀器使用壽命。HPLC日常操作注意事項:


    1、選擇流動相時應注意的幾個問題:

    • 盡量使用高純度試劑作流動相,防止微量雜質長期累積損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。

    • 避免流動相與固定相發生作用而使柱效下降或損壞柱子。

    • 試樣在流動相中應有適宜的溶解度,防止產生沉淀并在柱中沉積。

    • 流動相同時還應滿足檢測器的要求。當使用紫外檢測器時,流動相不應有較強的紫外吸收,一般檢測波長應大于流動相的截止波長。

     

     

    2、泵的維護保養:

    •  防止任何固體微粒進入泵體,否則會磨損柱塞、密封環缸體和單向閥,因此應預先對流動相進行過濾,可采用Millipore濾膜(0.22μm或 0.45μm )等過濾。泵的入口都應該連接砂濾棒(或片), 輸液泵的濾器應經常更換。

    • 流動相不應含有任何腐蝕性物質, 含有緩沖液的流動相不應保留在泵內, 尤其是停泵過夜或更長時間。分析工作結束后必須用純水充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合固定相,可以是甲醇或甲醇和水)

    • 泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、密封環或缸體,終產生漏液。

    • 輸液泵的工作壓力不要超過規定的高壓力,否則會使高壓密封環變形,產生漏液。

     

    3、紫外檢測器維護保養:

    • 流通池進入氣泡會干擾基線,并極難排出,應使用充分脫氣的流動相,以減少氣泡的產生。

    • 應定期沖洗系統,避免流通池干涸。

    • 檢測器中氘燈( 光源) 隨著使用時間的增加,氘燈強度降低,噪音會不斷增大,故分析前柱平衡得差不多時,再打開檢測器,分析工作結束及時關閉檢測器(頻繁開關檢測器也會縮短檢測器壽命,一般開啟間隔少于4小時,不建議關閉檢測器)。 

    • 塵埃在靜電的作用下容易覆蓋在光學元件上, 使光傳播效率降低,增加了光散射, 影響分析效果, 因此檢測器周圍的環境應保持清潔。

       

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